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- 英文名稱：Bovine phosphorylated adenylate activated protein kinase (P-AMPK)ELISA kit
- 品牌：佰利萊生物
- 產(chǎn)地：上海
- 貨號：BLL111831E
- 價格： ￥805/盒
- 發(fā)布日期： 2024-04-08
- 更新日期： 2026-01-07
| 產(chǎn)地 | 上海 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 佰利萊生物 |
| 貨號 | BLL111831E |
| 用途 | 科研試驗 |
| 檢測方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
| 保質(zhì)期 | 6個月 |
| 適應(yīng)物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動植物 |
| 檢測限 | 0- |
| 數(shù)量 | 99 |
| 英文名稱 | Bovine phosphorylated adenylate activated protein kinase (P-AMPK)ELISA kit |
| 包裝規(guī)格 | 96T/48T |
| 標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記物 |
| 樣本 | 血清,血漿,唾液,尿液,組織,細(xì)胞上清,裂解液等 |
| 應(yīng)用 | 定性檢測/定量檢測/酶活檢測 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
佰利萊生物elisa試劑盒原理:免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理,對待測抗體或者抗原進(jìn)行分析測定的方法,酶聯(lián)免疫吸附分析(下稱ELISA)是免疫分析的一種,分三個部分組成:免疫識別,信號輸出和數(shù)據(jù)處理。
步驟:免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體,而后利用抗體識別待測的抗原(通常是疾病的蛋白質(zhì)生物標(biāo)記物,病毒,細(xì)菌等等,從復(fù)雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)、熒光或放射性標(biāo)記的抗體通過直接或者間接的方式輸出識別信號。最-后利用信號強(qiáng)度,標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度梯度等信息計算得出待測樣中目標(biāo)抗原的濃度。
分類:根據(jù)免疫識別和信號輸出方式的不同,ELISA可以分為雙抗體夾心法、直接免疫競爭法和非直接免疫競爭法等等。其中雙抗體夾心法在商業(yè)應(yīng)用上最常見。
雙抗體夾心法:
1.抗體包被 在96孔板上包被抗體。由于酶標(biāo)板是由聚苯乙烯制成,其含有的苯環(huán)與抗體的氨基酸殘基具有類似π-π堆積作用的引力,結(jié)合靜電和疏水作用,可以將抗體吸附于其表面。然后,將未吸附的抗體用緩沖液清洗后,加入含有明膠或牛血清蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)的封閉液以封閉酶標(biāo)板上未結(jié)合抗體的部分。加入封閉液的目的,是防止其他蛋白因靜電或疏水作用吸附在96孔板上,造成假陽性信號,干擾后續(xù)實驗的進(jìn)行。
2.免疫識別 在96孔板上包被抗體后,加入待測樣,并在37°C環(huán)境下孵育一段時間,通常是1-2小時。此時酶標(biāo)板上的抗體與待測抗原進(jìn)行特異性識別結(jié)合。此處抗體的質(zhì)量是關(guān)鍵,好的抗體既能特異性高效地結(jié)合抗原又不受待測樣中其他生物大分子、蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽等成分的影響。
3.洗板 將未結(jié)合的抗原洗掉,加入該抗原所對應(yīng)的識別抗體并在37°C下繼續(xù)培養(yǎng)1-2小時,接著將未連接上抗原的抗體洗掉。
4.酶標(biāo)信號輸出 加入帶有辣根過氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)標(biāo)記的酶標(biāo)二抗,用于和標(biāo)準(zhǔn)抗體結(jié)合。在培養(yǎng)30分鐘后洗掉未連接的二抗,并加入顯色劑顯色。根據(jù)顯色的結(jié)果判斷抗原的濃度。一般認(rèn)為,抗原濃度與顯色后的發(fā)光強(qiáng)度呈正相關(guān)。
