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      上海佰利萊生物科技有限公司
      產(chǎn)品展廳
      微生物副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)ELISA試劑盒
      • 品牌:佰利萊生物
      • 產(chǎn)地:上海
      • 型號:48T/96T
      • 貨號:BLL109119E
      • 價格: ¥874/盒
      • 發(fā)布日期: 2024-05-08
      • 更新日期: 2026-01-07
      產(chǎn)品詳請
      產(chǎn)地 上海
      保存條件 2-8℃
      品牌 佰利萊生物
      貨號 BLL109119E
      用途 科研實驗
      檢測方法 酶聯(lián)免疫法
      保質(zhì)期 6個月
      適應(yīng)物種 微生物細菌
      檢測限 3pg/mL - 150pg/mL
      數(shù)量 999
      包裝規(guī)格 48T/96T
      標記物 HRP標記物
      樣本 生物樣本
      應(yīng)用 定量檢測
      是否進口

      副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

            使用說明書

      本試劑盒僅供研究使用。
      檢測范圍:
      3pg/mL - 150pg/mL
      使用目的:
      本試劑盒用于測定微生物樣本中副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)含量。
      實驗原理
      本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)水平。用
      純化的副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗
      的微孔中依次加入副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP),再與 HRP 標記的副溶血性弧菌宿
      主殘留蛋白(VP HCP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過 洗滌后加底物
      TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏
      色的深淺和樣品中的副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波
      長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中副溶血性弧菌宿主殘留蛋白(VP HCP)
      濃度。
      標本要求
      1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
      馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
      2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
      操作步驟
      1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
      釋。

      2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、

      待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,
      然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
      量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
      4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
      重復(fù) 5 次,拍干。
      6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
      7. 溫育:操作同 3。
      8. 洗滌:操作同 5。
      9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
      10 分鐘.
      10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
      11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止
      液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

      操作程序總結(jié):

      計算
      以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
      準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
      即為樣品的實際濃度。
      注意事項
      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
      用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
      2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
      控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
      4. 請每次測定的同時做標準曲線, 做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
      大于標準品孔 孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
      算時請 乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
      6.底物請避光保存。
      7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
      9.本試劑不同批號組分不得混用。
      保存條件及有效期
      1.試劑盒保存:;2-8℃。
      2.有效期:6 個月
      聯(lián)系方式
      手機:19121610072
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